在一般人的世界里其实不知道胰岛素是什么东西。但是在糖尿病的眼中它却是不一样。胰岛素直接影响做他们的身体健康。然而对于很多的朋友来讲,他们并不知道胰岛素怎么去检测。那么下面就为朋友们介绍两种胰岛素的而检测方法。
简单介绍胰岛素的测定方法摘要
胰岛素是体内一类重要的多肽激素,同时它也是临床上治疗糖尿病的一线药物。因此不论是在体测定胰岛素的含量,还是在复杂的药物体系中对胰岛素准确定量,意义都非常重大。正如我们所知,为了正确评价不同剂型中的胰岛素在人体中的确切疗效和安全性,必须研究胰岛素在动物和人体内的药代动力学、吸收、分布、代谢和排泄的规律,这是解释生理学、药效学和毒理学正确合理地进行临床试验必不可少的重要资料,而对胰岛素的准确定量正是这些研究工作的基础。
另外,对于药剂本身而言,对胰岛素的准确定量,不但是质量标准的建立的基础,而且也是评价药物处方的关键。关键词:胰岛素;生物检定;免疫学与传统药物相比,胰岛素类药物属生物技术药物,它们本身具有种属特异性、免疫原性和非预期的多向性活性等特点,这就给胰岛素类药物的分析方法提出了特殊的要求。特别是药代动力学研究,它的前提就是建立可靠的测定方法。好的胰岛素测定方法的主要标志是:特异性高,灵敏度高、重现性好、回收率高、线性范围宽。如何专一地识别胰岛素又不受其它组分的干扰是检测方法建立的主要难题,另外胰岛素的给药量一般极低,更要求高灵敏度测定方法。许多常规的药物分析方法在用于胰岛素分析时在特异性、灵敏度和精确度方面都有所欠缺。本文扼要介绍目前用于胰岛素测定的主要方法。
1.生物检定法生物检定法的基本原理
是在体内和体外组织,或细胞对被测药物的某种特异反应,通过剂量(或浓度)效应曲线对目标生物技术药物定量分析(绝对量或比活性单位),一般分为在体分析和离体组织(细胞)分析两种。整体生物分析法测定过程对实验条件的要求较严格,操作程序较多,而许多活性细胞因子已建国际通用的标定国际单位的特定依赖细胞株和标准方法,利用这些系统进行研究是相对可靠的。对于体内实验,一般需要建立动物模型,观察指标也需要建立相应的检查方法,因而耗时数周才能完成,价格昂贵又费时,而且观察终点受主观因素影响,造成灵敏度较低。但是生物检定法是以药物的活性为评价标准,因而其最大优点是能反映生物活性。
尤其是胰岛素的生物活性不仅取决于一级结构而且与三级结构有关,因此生物检定法迄今在对胰岛素的研究及应用中有特殊的地位,常常是首先建立的测定方法。胰岛素最常用的生物检定法有小鼠(或兔)血糖法(毛细管法)和小鼠惊厥法。有人对这两种方法进行比较,认为小鼠血糖法可以消除人为误差,更为准确。目前国内外药典中胰岛素类系列制品效价测定,已将经典的生物检定法全部改为高效液相色谱法(HPLC)。
2.免疫学方法(immunemethods)
免疫学方法是利用蛋白多肽药物抗原决定簇部位的单克隆或多克隆抗体特异地识别被检药物,再以放射计数,比色等方法予以定量,即将特异的抗原抗体反应配以灵敏检测的方法。免疫学方法的缺点在于它测定的是蛋白多肽的免疫活性而不是生物活性;不能同时测定代谢物,而且具有抗原决定簇的代谢片段可能增加结果误差;不同来源的抗体与相同的蛋白多肽反应可能有较大的差别;还可能受到内源物质的干扰。但免疫法毕竟是一种迅速、灵敏、适于批处理的方法,已有数十种蛋白多肽被开发成能满足药物动力学研究的商品药盒。其他以免疫为基础的有助于生物技术药物分离和鉴定的分析方法还有免疫沉淀法亲和层析法和免疫印迹法。常用的免疫学方法有以下四种。
以上两种胰岛素检测方法就为你介绍到这里。其实如是在条件不允许的情况下,还是建议朋友们到医院去检查。那样医生既能详细的给你解答。同时在你不知道自己是那种病症的时候也能很好的确认。希望朋友们能在病魔面前有一个健康的心态。